Mať svoju vlastnú rodinu a dieťa je prirodzeným snom každého človeka. Môže sa zdať, že počatie potomka je jednou z najjednoduchších vecí na svete, no nie je tomu vždy tak. Až 1 zo 6 párov je v súčasnosti neplodný a až 17 % párov trpí vážnymi poruchami plodnosti. Mimotelové, alebo hovorovo umelé oplodnenie (z angl. In vitro fertilization, skratka IVF) je jedným z typov techník asistovanej reprodukcie.
Prvým krokom je úvodná konzultácia v centre asistovanej reprodukcie. U žien ide štandardne o hormonálne, imunologické a ultrazvukové vyšetrenie. Pre podstúpenie mimotelového oplodnenia je nevyhnutné získať väčší počet zrelých vajíčok. Preto sa vaječníky stimulujú podávaním hormónov. Po hormonálnej stimulácii nasleduje odber vajíčok, ktoré dozreli vo folikuloch. Vajíčka sa odsajú z vaječníkov (ovárií) vpichom cez pošvu pod ultrazvukovou kontrolou. Folikulárna tekutina s vajíčkami sa zbiera do skúmavky, ktorá sa odovzdáva do embryologického laboratória. Zákrok sa robí v krátkej celkovej anestézii.
Odber spermií najčastejšie prebieha v rovnaký deň ako mimotelové oplodnenie v tzv. odberovej miestnosti v centre asistovanej reprodukcie. Po úspešnom odbere vajíčok a spermií sa vajíčka oplodnia v laboratóriu. Najúčinnejšou metódou pri liečbe ťažších foriem mužskej neplodnosti je metóda ICSI (intracytoplazmatická injekcia spermie do vajíčka). Ide o mechanické vpravenie jednej spermie do vajíčka pomocou mikroihly pod špeciálnym mikroskopom.
Kultivácia prebieha po odbere vajíčok, presnejšie po ich oplodnení spermiami a trvá dva až tri dni. Embryotransfer je prenos embrya do maternice, ktorý nasleduje po jeho úspešnej kultivácii v inkubátore. V prípade transferu už predtým mrazeného embrya hovoríme o tzv. kryoembryotransfere. Pacientka otehotnie, ak sa niektoré z embryí uhniezdi na sliznici maternice. Po transfere je vhodné odpočívať a zbytočne nezaťažovať telo fyzickou aktivitou. Desiaty až štrnásmy deň po embryotransfere príde pacientka na tehotenský test (odberom krvi sa zistí hladina hormónu hCG).
V centrách asistovanej reprodukcie sa používajú aj doplnkové metódy, ktoré zvyšujú pravdepodobnosť otehotnenia hneď počas prvého cyklu mimotelového oplodnenia. Medzi tieto metódy patrí napríklad preimplantačné genetické vyšetrenie embryí alebo špeciálne vyšetrenia spermií (EmbryoGlue). Mimotelové oplodnenie môže byť emocionálne náročné ako pre pár, tak i pre celú rodinu. Nie je výnimkou, že páry, ktoré podstúpia mimotelové oplodnenie bojujú počas celého procesu s obavami a strachom z neúspechu.
Možné zdravotné riziká spojené s liečbou neplodnosti sa dajú vďaka odbornosti lekárov a moderným technológiám redukovať na minimum. Mimotelové oplodnenie už nie je tak drahé a neodstupné ako tomu bývalo v minulosti. Svoj postoj k úhrade IVF zmenili zdravotné aj komerčné poisťovne. Na Slovensku existuje komerčné poistné krytie neplodnosti, pričom zdravotné poisťovne hradia tri cykly mimotelového oplodnenia ženy do dovŕšenia 39.
Mimotelové oplodnenie je zloženeé z množstva krokov a celý proces môže trvať aj niekoľko mesiacov. Vyšetrenie imunitného systému oboch partnerov sa vykonáva v prípadoch, keď vznikne podozrenie na možnú imunologickú príčinu poruchy plodnosti. K poruchám môže dochádzať jednak v tzv. humorálnej (protilátkovej), tak aj v bunečnej imunite. Na plodnosť párov majú vplyv ochorenia, ako celiakia, porucha činnosti štítnej žľazy, fosfolipidový syndróm, prekonané chronické zápalové ochorenia apod.
Tieto ochorenia môžu prebiehať skryte, bez zjavných obťaží. Ale naštartujú zápalovú reakciu v organizme, a tak narušia rovnováhu imunitných mechanizmov. Tehotenstvo potrebuje navodenie tzv. imunologickej tolerancie, zápal mu škodí. Cieľom imunologického vyšetrenia je diagnostikovať príčinu nerovnováhy, tu následne vhodne liečiť a obnoviť. Ženám so sterilitou sa nedarí spontánne otehotnieť. Hľadáme preto príčinu problémov hneď na začiatku procesu, tj. Reprodukčné protilátky, tzn. Aktivita NK buniek - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, liniiou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme expresiu znaku CD69 na povrchu NK a NKT buniek.
Vysoká expresia aktivačných znakov po stimulácii spermiami alebo trofoblastom, svedčí o zvýšenej cytotoxickej reaktivite namierenej proti antigénom partnera/plodu a môže ovplyvniť úspešnosť počatia alebo zvýšiť riziko potratu. Produkcia cytokínov - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, líniou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme množstvo cytokínov vo vnútri buniek. Ženy s infertility otehotnenia, ale nie sú schopné donosiť a porodiť životaschopný plod. U tejto skupiny je potrebné dôkladnejšie vyšetriť, či vôbec došlo k navodeniu tolerancie k plodu, alebo či tu existuje riziko upchatia ciev mikrotrombmi.
Základné parametre, tzn. AMH (anti-müllerianský hormón) - množstvo tohto hormónu koreluje s individuálnou ovariálnou rezervou vajíčok. Aktivita NK buniek - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, líniou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme expresiu znaku CD69 na povrchu NK a NKT buniek. Produkcia cytokínov - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, liniu trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme množstvo cytokínov vo vnútri buniek. U týchto žien sa spravidla ponúka panel na infertilítu.
V rámci komplexného pohľadu na danú problematiku je zásadné, aby vyšetrenie podstúpil aj muž. V imunologickom laboratóriu sú zavedené metódy stanovenia kvality spermií v ejakuláte pomocou prietokovej cytometrie. Cytometrické vyšetrenie ejakulátu je možné urobiť z tej istej vzorky ejakulátu z ktorej bol vykonaný spermiogram. Apoptóza je riadená smrť buniek. Jedná sa o prirodzený proces, pri ktorom dochádza k postupnému odumieraniu spermií, fragmentácii DNA i k zmenám na povrchu buniek. Pomer apoptotických a živých spermií, určuje kvalitu ejakulátu.
V zdravom ejakuláte by malo byť viac než 50 % živých spermií a menej než 50 % spermií apoptotických. Vysoké zastúpenie apoptotických spermií je zisťované u pacientov s infekciami, autoimunitnými ochoreniami alebo patológiami v oblasti urogenitálneho traktu. Stanovenie počtu spermií s fragmentovanou DNA, vykonávame cytometricky pomocou metódy TUNEL. Do DNA spermií sa pomocou enzýmu naviaže farbička a označí poškodenú DNA. V kvalitnom ejakuláte je menej než 20 % spermií s fragmentovanou DNA.
Mierne zvýšená hodnota je 20-30%. Čím viac je vo vzorke spermií s fragmentovanou DNA, tým nižšia je pravdepodobnosť úspešného oplodnenia oocytu. Ponúkame taktiež cytometrické vyšetrenie koncentrácie spermií a leukocytov v ejakuláte, stanovenie počtu spermií s nekvalitným akrozómom alebo bez akrozomálnych proteínov. Mikroskopicky vykonávame vyšetrenie prítomnosti protilátok proti spermiám. Protilátky môžu výrazne inhibovať pohyb spermií. Príčinou infertility mužov môže byť i porucha imunitného systému alebo autoimunita.
Našou snahou je „dávať veci dohromady“. Páry, ktoré majú za sebou dlhoročné martírium, keď sa snažia o vytúženého potomka, prešli množstvom vyšetrení. Často sa ale nepodarilo poskladať informácie dohromady a nájsť dôvod neúspechu. Tým, že sa všetky vyšetrenia vykonávajú v jednom laboratóriu a spravidla pár prichádza spoločne, máme ucelený prehľad, a je teda väčšia šanca, že nejaký dôvod objavíme.
V rámci imunologických balíčkov sa ponúka základný panel a kompletný panel vyšetrení, ktoré môžu zahŕňať aj genetické konzultácie a ďalšie testy podľa odporúčaní klinického genetiky. U párov s diagnostikovanou poruchou imunity je potrebné zvoliť vhodnú sadu vyšetrení a následne cielene liečebný postup.
Ako funguje IVF | Príbeh plodnosti | BBC Earth Science
- Základné vyšetrenia v IVF centre: anamnéza, ultrazvuk, AMH, hormonálny profil, spermiogram, endometriálny stav.
- Imunologické vyšetrenia: protilátky proti spermiám, proti trofoblastu, antifosfolipidové protilátky, bunková imunita, NK bunky, cytometria a TUNEL test DNA spermií.
- Genetické vyšetrenia: karyotyp, genetické konzultácie, trombofilné mutácie a ďalšie testy podľa potreby.
- Podpora páru: spolupráca oboch partnerov, individualizovaný liečebný plán, start liečby ešte pred počatím alebo v skorom tehotenstve.
Imunologické vyšetrenie je významné aj pri opakovaných potrate alebo pri neúspešných IVF pokusoch. Zistenia imunitných účinkov môžu vysvetliť, prečo embryo neostane v maternici, a umožniť cielenú liečbu. Zásadou je, že imunúti sa treba venovať opatrne a cielene až po rozbore všetkých vyšetrení a vylúčení iných príčin neplodnosti.
Vyšetrenie uterinných NK buniek - biopsia endometria v presne stanovenom čase cyklu - môže odhaliť poruchy tolerancie plodu a zlepšiť výsledok implantácie. Spermiogram a imunologické vyšetrenia sú často vykonávané v rámci jedného centra pre lepšiu koordináciu a efektívne využitie času a financií.
V prípade pozitívneho základného panelu môže lekár odporučiť doplňujúce vyšetrenia z príslušnej skupiny vyšetrení. V rámci nedostatkov v imunite je tiež dôležité zvážiť liečebné postupy pred samotnou implantáciou embrya a počas tehotenstva, aby sa minimalizovali riziká pre matku aj plod.
Zhrnutie významu imunologického vyšetrenia: Imunologické vyšetrenia v rámci pred IVF postupom slúžia na identifikáciu a liečenie potenciálnych príčin neúspechu implantácie alebo tehotenstva spôsobených imunitnými mechanizmami. Diagnóza a včasné zahájenie liečby môžu zvýšiť úspešnosť IVF a pomôcť párom dosiahnuť vytúžené tehotenstvo.
tags: #imunologicke #vysetrenie #pred #ivf